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組織芯片

組織芯片(tissue chip)又稱(chēng)組織微陣列(tissue microarray,TMA),是將數(shù)十至上千個(gè)小組織整齊地排列在一張載玻片上而制成的組織切片,它是繼基因芯片、蛋白質(zhì)芯片之后出現(xiàn)的又一種重要的生物芯片,主要用于研究同一種基因或蛋白質(zhì)分子在不同細(xì)胞或組織中表達(dá)的情況。

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實(shí)驗(yàn)介紹

【技術(shù)原理】

組織芯片(tissue chip)又稱(chēng)組織微陣列(tissue microarray,TMA),是將數(shù)十至上千個(gè)小組織整齊地排列在一張載玻片上而制成的組織切片,它是繼基因芯片、蛋白質(zhì)芯片之后出現(xiàn)的又一種重要的生物芯片,主要用于研究同一種基因或蛋白質(zhì)分子在不同細(xì)胞或組織中表達(dá)的情況。


【實(shí)驗(yàn)流程】


組織芯片流程圖.png

案例展示


組織芯片.jpg

不同例數(shù)的組織芯片

常見(jiàn)問(wèn)題

1、組織芯片的切片不要連續(xù)切片,每一張都需用冰塊將組織冷凍一次;

2、若有的組織過(guò)于干脆,需用霧化器或溫水的濕毛巾擦拭后切片;

3、撈片的水溫按石蠟的熔點(diǎn)減去15℃左右,一般水溫控制在42-45℃之間,水溫太熱會(huì)造成組織散開(kāi),水溫太低,蠟片會(huì)有褶皺;

4、使用平推式切片機(jī)切組織芯片效果更佳;

5、最好使用一次性刀片;

6、切片一般為4um為佳。

送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)

樣品類(lèi)型樣品需求保存條件運(yùn)輸條件備注
新鮮組織新鮮取材組織,用 PBS 清洗干凈血液等,立即-80℃保存-80℃干冰所有樣本均須有唯一標(biāo)記,且標(biāo)記清晰可識(shí)
一般固定組織一般組織體積不超過(guò)2cmX2cmX0.5cm,固定時(shí)盡量保持組織的原有形態(tài)并清理干凈血液及多余部分,如腸道內(nèi)容物;固定液體積為組織大小的10倍以上,容器足夠容納組織不使其擠壓變形。標(biāo)注好固定液類(lèi)型和固定時(shí)長(zhǎng)常溫常溫
特殊固定組織睪丸、眼球、脊髓、肌肉等組織:推薦使用對(duì)應(yīng)的特殊固定液進(jìn)行固定,以保證固定效果。如Bouin液,適用于睪丸組織、皮膚組織及眼球的固定

組織蠟塊組織由標(biāo)準(zhǔn)的石蠟包埋盒包埋(尺寸為30*24*7mm),石蠟與組織要均勻接合,不能有裂痕;蠟塊厚度根據(jù)所需切片的數(shù)量而定,有效厚度至少要超過(guò) 0.1cm。盡量提供半年內(nèi)的組織蠟塊,超過(guò)半年的蠟塊抗原可能丟失,做免疫組化可能出現(xiàn)檢測(cè)不到蛋白。常溫常溫
組織切片需用防脫載玻片進(jìn)行撈片,并注明切片厚度、已烤片溫度與時(shí)間,組織應(yīng)在靠近切片下端 1/3 處。4℃冰袋
細(xì)胞爬片使用 12 孔板或 24 孔板專(zhuān)用細(xì)胞爬片,細(xì)胞爬片經(jīng)固定后用 PBS 洗滌 2~3 次,保存在 PBS 中,用封口膜密封孔板。每個(gè)爬片在孔板蓋上應(yīng)有唯一的標(biāo)記,并有電子版的分組信息,以防標(biāo)記在運(yùn)輸途中模糊。常溫常溫
植物樣本新鮮組織FAA固定,木質(zhì)化程度不高;對(duì)于較薄的葉片,如果要求平行葉片切片,難以保證切完整;根莖要求直徑>1mm常溫常溫
抗體保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識(shí)別此抗體的標(biāo)記,并附帶說(shuō)明書(shū),抗體的量應(yīng)大于實(shí)驗(yàn)所需的量。組織切片、組織芯片按稀釋后 100μl 一張切片計(jì)算抗體用量, 24 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 200μl 一張計(jì)算抗體用量,12 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 400μl 一張計(jì)算抗體用量。-20℃冰袋或干冰




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