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    TTC染色步驟和數(shù)據(jù)分析由普拉特澤生物組織染色實驗平臺為大家總結(jié)分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長期穩(wěn)定的TTC染色外包實驗服務(wù)，本文給大家分享咱們技術(shù)長期總結(jié)下來的TTC染色步驟+數(shù)據(jù)分析：

1.大鼠麻醉后，快速取出腦組織(10min內(nèi));

2.置于0-4℃℃PBS溶液中轉(zhuǎn)移，將腦組織-20℃冷凍20min;

3.將冷凍后的腦組織切成厚度為2 mm的薄片;

4.將腦組織切片置于1%TTC溶液中，37℃℃避光孵育30min，每5min輕微晃動容器，使充分染色。

5.取出染好的切片，觀察染色情況，白色即為梗死區(qū)域。

6.選擇每一切片的尾側(cè)面用病理圖文分析系統(tǒng)進行圖像分析,測量每片的梗死面積和總面積。(每層梗死體積為該層梗死面積和層厚的乘積,各層的梗死體積之和即為總的梗死體積。

二、TTC計算分析:

1.原始圖片數(shù)據(jù)(PS初步合圖處理)2.分析處理步驟:純黑或純白背景轉(zhuǎn)換

(1)process(2)segmentation

（3）color cube basedwhite or black(5)吸管工具(不停點擊切片位置，選取圖片)(6)create previewimage

三、TTC計算分析:

1.計算分析步驟:
(1)measure
(2)count/size

(3)Select colors
(4)調(diào)整顏色通道:HSI通道 H:0-255;S:0-255;1:14-255

四、TTC計算分析:

3.計算分析步驟:(5)Measure-Select Measure

(6)設(shè)置面積選擇大小(1)area(2)1000-1000000(可根據(jù)實際情況而定)

五、TTC計算分析:

3.計算分析步驟:

(7)Count:開始計算

(9)查看計算結(jié)果和數(shù)據(jù)統(tǒng)計:

(8)計算后界面顯示:

六、TTC計算分析:
4.數(shù)據(jù)查看與導(dǎo)出:

導(dǎo)出步驟一:data to file導(dǎo)出步驟二:選擇導(dǎo)出格式

5.梗死面積選定設(shè)置:

HIS模式H:0-255;S:0-45;1:150-255(可根據(jù)實際情況調(diào)整)

6.設(shè)置完成，開始統(tǒng)計計算:count;后面步驟和前面總面積計算一樣進行，查看數(shù)據(jù)統(tǒng)計與數(shù)據(jù)文件導(dǎo)出，最后統(tǒng)計數(shù)據(jù)

7.總結(jié)總體面積與梗死面積，統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論，

如果你總是在做實驗時總會遇上這樣那樣的問題需要幫助時，請記得在TTC染色實驗中遇到技術(shù)問題可添加技術(shù)微信：18570028002我司還提供組織染色外包服務(wù)或?qū)嶒炁嘤?xùn)