細(xì)胞凋亡檢測
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動實施的一種程序性死亡，是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。
相關(guān)實驗
實驗承諾函
咨詢記錄
技術(shù)文章
城市
時間
浙江省溫州市
2025-05-10 07:00:49
山東省
2025-05-10 06:52:49
江蘇省南通市崇川區(qū)
2025-05-10 02:52:34
江蘇省南通市崇川區(qū)
2025-05-09 23:00:12
國外
2025-05-09 22:52:19
浙江省溫州市
2025-05-09 18:52:05
江蘇省
2025-05-09 17:10:29
浙江省麗水市
2025-05-09 16:25:43
江蘇省南通市崇川區(qū)
2025-05-09 14:51:49
江蘇省
2025-05-09 14:44:21
巨噬細(xì)胞分型研究方法
2024-07-31 11:36:29
巨噬細(xì)胞分型m1m2區(qū)別
2024-07-30 17:19:03
流式檢測陰行對照意義
2024-01-24 13:43:45
流式細(xì)胞檢測報告概述
2024-01-23 14:08:31
流式檢測ros結(jié)果分析
2024-01-22 13:50:39
流式細(xì)胞檢測實驗步驟總結(jié)
2024-01-19 11:33:16
流式檢測實驗報告——細(xì)胞周期檢測
2024-01-17 17:26:59
巨噬細(xì)胞流式檢測方法【巨噬細(xì)胞實驗外包】
2022-11-18 15:07:10
巨噬細(xì)胞極化實驗步驟【巨噬細(xì)胞實驗外包】
2022-11-18 14:41:00
巨噬細(xì)胞分離與純化步驟【巨噬細(xì)胞實驗外包】
2022-11-18 14:24:25
巨噬細(xì)胞培養(yǎng)方法與步驟【巨噬細(xì)胞實驗外包】
2022-11-16 16:58:12
什么巨噬細(xì)胞？【巨噬細(xì)胞實驗外包】
2022-11-16 16:41:39
粒細(xì)胞檢測實驗原理與流程【粒細(xì)胞檢測外包】
2022-11-15 14:03:19
什么是粒細(xì)胞？【粒細(xì)胞檢測外包】
2022-11-15 13:56:29
Th淋巴細(xì)胞亞群檢測步驟【淋巴細(xì)胞亞群檢測外包】
2022-11-10 17:10:39
淋巴細(xì)胞亞群檢測實驗原理與介紹【淋巴細(xì)胞亞群檢測外包】
2022-11-10 17:03:55
活性氧檢測化學(xué)發(fā)光法實驗步驟【活性氧檢測外包】
2022-10-27 17:38:21
活性氧檢測熒光法實驗步驟【活性氧檢測外包】
2022-10-27 17:26:37
活性氧（ROS）檢測介紹【活性氧檢測外包】
2022-10-27 17:15:38
細(xì)胞凋亡檢測常見問題與解決方法——細(xì)胞凋亡檢測外包
2022-03-23 11:10:18
細(xì)胞凋亡檢測實驗注意事項——細(xì)胞凋亡實驗外包
2022-03-17 13:29:46
細(xì)胞凋亡檢測詳細(xì)實驗步驟——細(xì)胞凋亡檢測外包
2022-03-16 15:50:28
什么是細(xì)胞凋亡？——科研小白打基礎(chǔ)
2022-03-16 11:50:11
什么是流式細(xì)胞術(shù)？——一文帶你讀懂
2022-03-11 13:59:56
流式檢測——細(xì)胞周期檢測常見問題解答與處理【干貨滿滿】
2022-03-10 14:56:49
流式檢測細(xì)胞周期實驗注意事項——細(xì)胞周期實驗外包
2022-03-10 10:22:30
流式檢測細(xì)胞周期原理及實驗步驟分析——科研小白
2022-03-09 14:29:36
大鼠外周血Th17細(xì)胞流式染色案例
2021-06-11 10:00:39
M1和M2型巨噬細(xì)胞流式染色實例
2021-05-26 14:42:33
Treg細(xì)胞流式染色及檢測實例分析
2021-05-20 16:55:21
流式檢測細(xì)胞實驗方法及檢測結(jié)果圖解讀
2021-04-21 14:09:08
細(xì)胞凋亡的檢測方式原來不只流式，這幾種你都知道嗎？
2021-04-12 15:26:44
如何用流式鑒別細(xì)胞死活
2021-03-04 15:18:10
如何用流式檢測巨噬細(xì)胞
2021-01-11 17:20:44
流式結(jié)果怎么看【干貨文章】
2020-07-20 16:54:04
實驗介紹
【應(yīng)用簡介】
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動實施的一種程序性死亡，是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。
【技術(shù)原理】
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。因此Annexin V作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將AnnexinⅤ進(jìn)行熒光素FITC標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin V作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。碘化丙錠（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但對凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI能夠透過細(xì)胞膜使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細(xì)胞區(qū)分開來。
【實驗方法】
Step1：細(xì)胞培養(yǎng)
Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理
Step3：細(xì)胞收集
Step4：加凋亡試劑
Step5：上機(jī)檢測
案例展示
A) control組； B) 處理組low； C) 處理組middle； D) 處理組high
左下象限LL為活細(xì)胞；右下象限LR為早期凋亡細(xì)胞，右上象限UR為晚期凋亡；左上象限UL為碎片及死亡細(xì)胞。
常規(guī)凋亡率可計算UR+LR
技術(shù)總結(jié)
1、考慮到進(jìn)行流式時需要用到對照組細(xì)胞設(shè)置空白組（用于調(diào)節(jié)電壓）和單染組細(xì)胞（用于調(diào)節(jié)補(bǔ)償），因此要求該組細(xì)胞量較其他組多；
2、如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度偏低，細(xì)胞量較少，則適當(dāng)增加離心時間。收集細(xì)胞時，應(yīng)該連同上清一起收集，同時胰酶消化時間不宜過長，否則容易引起假陽性；
3、檢測細(xì)胞經(jīng)過轉(zhuǎn)染等處理后可能會帶有自發(fā)熒光，應(yīng)注意選擇凋亡試劑盒的顏色通道 如：帶綠色熒光時，應(yīng)選擇7AAD試劑盒；
4、細(xì)胞鋪板應(yīng)選擇細(xì)胞狀態(tài)良好的時候進(jìn)行，且避免反復(fù)吹打；
5、流式樣品檢測需提前2-3個工作日預(yù)約。 流式檢測細(xì)胞樣本：細(xì)胞樣品準(zhǔn)備時，使用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，不得使用細(xì)胞刮刀進(jìn)行操作，胰酶消化細(xì)胞時切忌消化過頭或沒有完全打開細(xì)胞間隙；
6、由于細(xì)胞活性問題，只接受活細(xì)胞樣本，當(dāng)天完成實驗。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
湘公網(wǎng)安備