DC細(xì)胞檢測(cè)
樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）的主要功能是吸收抗原，進(jìn)行加工，并向T淋巴細(xì)胞呈遞。其它抗原呈遞細(xì)胞也有此功能，如B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。 我們常用的檢測(cè)指標(biāo)： 樹(shù)突狀細(xì)胞（人）： CD83、CD141、、CD209、MHC II 樹(shù)突狀細(xì)胞（鼠）：CD11c、MHC II
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實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對(duì)含量，從而得到細(xì)胞群的相對(duì)比值。
樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）的主要功能是吸收抗原，進(jìn)行加工，并向T淋巴細(xì)胞呈遞。其它抗原呈遞細(xì)胞也有此功能，如B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。
我們常用的檢測(cè)指標(biāo)：
樹(shù)突狀細(xì)胞（人）： CD83、CD141、、CD209、MHC II
樹(shù)突狀細(xì)胞（鼠）：CD11c、MHC II
【實(shí)驗(yàn)流程】
組織：制成單細(xì)胞懸液-溶血-離心去上清-調(diào)整細(xì)胞密度-加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機(jī)
血液：溶血-離心去上清-調(diào)整細(xì)胞密度-加入相應(yīng)的表面標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機(jī)
案例展示
注意事項(xiàng)
由于血液和組織中DC細(xì)胞含量少，且缺乏特異的DC標(biāo)記物，所以DC細(xì)胞的研究非常困難。因此，關(guān)于DC細(xì)胞的了解主要來(lái)自于通過(guò)密度梯度離心、培養(yǎng)、和/或陰性選擇富集后的DC細(xì)胞的研究。
這些過(guò)程利用了DC細(xì)胞的密度和黏附特征，和在一定細(xì)胞因子條件下的選擇性生長(zhǎng)，或缺乏淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的系列標(biāo)記物的表達(dá)。但是，這些方法中DC細(xì)胞的產(chǎn)率和純度較低，且費(fèi)時(shí)費(fèi)力。而且，這些操作可以影響細(xì)胞的功能，并且無(wú)法做DC細(xì)胞含量的定量分析。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類(lèi)型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個(gè)細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
電話(huà)：400-691-6686
在線(xiàn)時(shí)間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號(hào)
湘公網(wǎng)安備