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        細胞劃痕實驗操作步驟由普拉特澤生物實驗技術(shù)為大家總結(jié)分享。細胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移的方法。普拉特澤生物——細胞實驗平臺專業(yè)承接細胞劃痕等細胞實驗代做服務(wù)，積累了大量的實操經(jīng)驗。今天小編就跟大家分享，在實操錘煉打磨中出來的細胞劃痕實驗Culture Insert方法和普通細胞劃痕的操作步驟，一起來看看吧~

        一、細胞劃痕實驗Culture Insert方法操作步驟

        1、準(zhǔn)備細胞，培養(yǎng)液，culture lnsert。

        2、如圖，將細胞接種于Dish中間的Insert，細胞長滿Insert 區(qū)域后用鑷子移除Insert即可產(chǎn)生500μm寬度的劃痕。

        3、每隔4-6小時拍照記錄。

        4、根據(jù)收集圖片數(shù)據(jù)分析實驗結(jié)果。

        二、常規(guī)細胞劃痕法操作步驟

        實驗器材：細胞培養(yǎng)板、marker筆、直尺、微升槍頭、培養(yǎng)基、PBS

        1、培養(yǎng)板劃線

        首先使用 marker 筆在 6 孔板背后，用直尺比著，均勻的劃橫線，大約每隔 0.5~1cm 一道，橫穿過孔。每孔至少穿過 5 條線。劃線時注意線不要太粗 。

        2、鋪細胞

        在孔中加入約 5×105 個細胞（不同的細胞數(shù)量有所不同，根據(jù)細胞的生長快慢調(diào)整），接種原則為過夜后融合率達到 100%。

        3、細胞劃線

        第二天用槍頭或者無菌牙簽，垂直與細胞平面，沿著頭一天劃在平板背面的線在細胞層上進行劃痕(不同孔之間最好使用同一只槍頭或牙簽)。

        4、洗細胞

        劃痕完成后，使用無菌 PBS 洗細胞 3 次，洗去不貼壁的細胞，即劃線時劃線的細胞，是劃線后留下的間隙清晰可見，然后更換新鮮無血清培養(yǎng)基。

        5、細胞培養(yǎng)、觀察

        將細胞放入 37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。然后在適當(dāng)?shù)臅r間點，如 0，6，12，24h 取出細胞，顯微鏡線觀察并測量劃痕的寬度，并拍照(具體時間依實驗需要而定)。

        6、結(jié)果分析

        使用 Image J 軟件打開圖片后，隨機劃取 6 至8 條水平線，計算細胞間距離的均值。

        注意：保持實驗環(huán)境的無菌性；選擇適當(dāng)?shù)募毎N壁；采用無血清培養(yǎng)液

        好啦，那實驗結(jié)果我們就分享到這里啦！如果您還有關(guān)于細胞劃痕實驗的操作問題需要咨詢或有細胞劃痕實驗代做的需求，可以直接留言給客服，技術(shù)會第一時間回復(fù)到您的哦！