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        大家好！今天普拉特澤生物帶大家學(xué)習(xí)的是細(xì)胞劃痕實驗的常見問題回答。細(xì)胞劃痕實驗是觀察掌握細(xì)胞遷移實驗過程中細(xì)胞活動的重要實驗方法，普拉特澤生物——細(xì)胞實驗平臺操作各類細(xì)胞的劃痕實驗上百例，專業(yè)代做細(xì)胞劃痕實驗和各種細(xì)胞實驗，對大家提出的各種關(guān)于細(xì)胞劃痕實驗的問題都一一做出了回答，希望能對迷茫的你起到一些幫助~

        問題一：細(xì)胞劃痕實驗為什么這么重要？

        答：因為細(xì)胞劃痕實驗是觀察細(xì)胞遷移活動的重要技術(shù)手段，而且簡單快捷、經(jīng)濟(jì)實惠（劃重點?。。。?/span>。細(xì)胞遷移參與到很多的如免疫、炎癥、腫瘤轉(zhuǎn)移、損傷修復(fù)、胚胎發(fā)育等生理和病理的活動中，有重要的臨床研究意義。

        問題二：細(xì)胞劃痕實驗為什么一般選擇6孔板？

        答：因為6孔板大小適中，可保證有相當(dāng)距離的平直劃痕，便于觀察;當(dāng)然若是需要高通量初篩時，也可以用12或者24孔板。

        問題三：為什么細(xì)胞接種密度要求過夜100%融合？

        答：如果過夜后細(xì)胞=沒有100%融合，雖然可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時間，但因細(xì)胞密度已經(jīng)很大，所以細(xì)胞狀態(tài)會逐漸變差，后續(xù)細(xì)胞可能不遷移而是凋亡。

        問題四：怎樣避免細(xì)胞增殖對細(xì)胞遷移實驗造成的假陽性結(jié)果？

        答：操作如下

        1、使用無血清或低血清培養(yǎng)基(<2%)可降低細(xì)胞增殖對實驗結(jié)果的影響

        2、一般認(rèn)為24h為細(xì)胞的一個周期，在選取合適的時間點(6，12，24h)檢測劃痕寬度時，最好不要超過細(xì)胞一個周期的時間

        3、如果要單純考慮細(xì)胞遷移，可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理1h，抑制細(xì)胞的分裂。

        問題五：結(jié)果怎樣拍照？

        答：按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，劃痕一次與5條定位線相交，就有10個可固定監(jiān)測點，以解決了前后觀察時位置不固定的問題。

        問題六：細(xì)胞不遷移怎么回事？

        答：避開細(xì)胞狀態(tài)的影響，需要考慮細(xì)胞自身的遷移能力，并非所有細(xì)胞都適合劃痕實驗，以乳腺癌為例，乳腺癌細(xì)胞MCF-7幾乎很難遷移，而MDA-MB-231具有很強(qiáng)遷移性。

        問題七：結(jié)果統(tǒng)計中，細(xì)胞計數(shù)和統(tǒng)計面積那個好用？

        答：根據(jù)細(xì)胞劃痕實驗的實驗結(jié)果選擇。如果細(xì)胞遷移輪廊比較清晰，并且遷移數(shù)量不多，我們可以選擇細(xì)胞計數(shù)；但如果細(xì)胞數(shù)比較多，連片生長，那么統(tǒng)計面積比細(xì)胞計數(shù)的方式更簡便且客觀。

        問題八：細(xì)胞劃痕技術(shù)有什么不足嗎？

        答：細(xì)胞劃痕實驗的不足主要包括：

        1、適用的細(xì)胞類型范圍小，一是需要遷移強(qiáng)的細(xì)胞，而且對無血清的環(huán)境有較強(qiáng)的忍受力

        (至少24h)然而很多腫瘤細(xì)胞系在無血清培養(yǎng)下，12h細(xì)胞凋廣就超過50%，因此細(xì)胞劃痕法對部分腫瘤細(xì)胞并不適用。

        2、自身操作的實驗誤差，如劃痕距離不一致等。

        好啦，那關(guān)于細(xì)胞劃痕實驗的各種問題咱們的計數(shù)就暫時先回答到這里啦，如果您還有更多問題需要補充的話可以留言給我們，技術(shù)會及時給到回復(fù)與解答的。

        當(dāng)然如果您有細(xì)胞劃痕和各類細(xì)胞實驗外包與代做的需求，請一定要認(rèn)準(zhǔn)普拉特澤生物！我們下期見~