小鼠腸炎模型構建方法詳解
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
小鼠腸炎模型是研究腸炎發(fā)病機制、評估藥物療效的重要工具,普拉特澤生物承接小鼠腸炎模型等動物實驗相關服務上萬例,積累了操作大量經(jīng)驗,可承接動物實驗外包服務。
下面我們進入正題——幾種常見的小鼠腸炎模型構建方法的詳解:
一、DSS誘導法
?DSS溶液配制?:
●稱取一定量的DSS,使用水溶解,配置成2%~5%(w)的DSS水溶液。DSS溶液配制好完成后可在4℃避光保存。
?造模過程?:
●將小鼠按照體重隨機分組。
●將小鼠水瓶內(nèi)的水溶液更換為DSS水溶液,按照5ml/只/天的量進行準備,隔兩天后更換新的DSS溶液(DSS給藥時為day1,在day3、day5更換DSS溶液)。
急性模型:第8天將DSS溶液更換為不含DSS的清水。
慢性模型:第8天將DSS溶液更換為不含DSS的清水,清水攝取持續(xù)14天后,重復前面的步驟2~3次。
?觀察與評估?:
●造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài),可以通過DAI評分判定小鼠成模情況。
●可以通過觀察結腸長度以及病理組織情況來評估造模效果。
二、TNBS誘導法
?試劑配制?:
●將TNBS溶于水,配制成5%TNBS(w)水溶液。
●配制橄欖油與丙酮比例為1:4(v)的均勻混合溶液,使用該混合液將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液;或者使用無水乙醇將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液。
?三、造模過程?:
●小鼠背部去毛(1.5×1.5 cm),取配制好的1%的TNBS溶液150μL均勻涂抹在去毛位置。
●七天后,小鼠麻醉后使用1ml注射器通過軟管將100μL的1%TNBS緩慢注射進入小鼠直腸內(nèi)(軟管插入直腸的長度大約4 cm),小鼠倒立保持約1分鐘。
?觀察與評估?:
●造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài),通過DAI評分判定小鼠成模情況。
四、惡唑酮誘導法
?試劑配制?:
●配制橄欖油與丙酮比例為1:4(v)的均勻混合溶液。
●使用橄欖油/丙酮混合液溶劑,稱取一定量的惡唑酮,配置成3%的惡唑酮給藥溶液;或者使用50%的無水乙醇配制得到1%的惡唑酮給藥溶液。
?造模過程?:
●小鼠背部去毛(1.5×1.5 cm),取配制好的惡唑酮溶液150μL均勻涂抹在去毛位置。
●七天后,小鼠麻醉后使用1ml注射器通過軟管將100μL的惡唑酮給藥溶液緩慢注射進入小鼠直腸內(nèi)(軟管插入直腸的長度大約4 cm),小鼠倒立保持約1分鐘。
五、觀察與評估?:
造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài),通過DAI評分判定小鼠成模情況。
四、注意事項
→在進行小鼠腸炎模型構建時,需要嚴格控制實驗條件,確保小鼠的飼養(yǎng)環(huán)境、飲食等條件一致。
→在造模過程中,需要注意操作細節(jié),如注射器的選擇、注射速度、注射量等,以避免對小鼠造成不必要的損傷。
→在觀察與評估階段,需要采用多種指標綜合評估模型的成功與否以及炎癥的嚴重程度。
綜上所述,小鼠腸炎模型的構建方法多種多樣,每種方法都有其特定的誘導機制和適用范圍。在選擇構建方法時,需要根據(jù)研究目的和實驗條件進行綜合考慮。
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