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      大家好，今天給大家介紹一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)，Southern Blot印跡雜交實(shí)驗(yàn)。 Southern Blot是研究DNA圖譜的基本技術(shù)，在遺傳病診斷、DNA圖譜分析及PCR產(chǎn)物分析等方面有重要價(jià)值。普拉特澤生物分子檢測(cè)平臺(tái)在southern Blot實(shí)驗(yàn)上總結(jié)了非常豐富的經(jīng)驗(yàn)，為廣大科研人員提供包括印跡雜交等分子檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的外包與技術(shù)協(xié)助服務(wù)，掃平您的科研路。

      Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測(cè)特定DNA分子的含量。

      Southern印跡雜交技術(shù)包括兩個(gè)主要過程：一是將待測(cè)定核酸分子通過一定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到一定的固相支持物（硝酸纖維素膜或尼龍膜）上，即印跡（blotting）；二是固定于膜上的核酸與同位素標(biāo)記的探針在 一定的溫度和離子強(qiáng)度下退火，即分子雜交過程。

      印跡方法如電轉(zhuǎn)法、真空轉(zhuǎn)移法；濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學(xué)活化膜（如APT、ABM纖維素膜）等。

      Southern Blot實(shí)驗(yàn)主要應(yīng)用在以下方面：

      1、遺傳病診斷

      2、DNA圖譜分析

      3、檢測(cè)樣品中的DNA及其含量

      4、PCR產(chǎn)物分析

      Southern Blot實(shí)驗(yàn)大概步驟：

      1、待測(cè)核酸樣品的制備

      2、 瓊脂糖凝膠電泳分離待測(cè)DNA樣品

      3、電泳凝膠預(yù)處理

      4、轉(zhuǎn)膜

      5、探針標(biāo)記

      6、預(yù)雜交（prehybridizafion）

      7、Southern雜交

      8、洗膜

      9、放射性自顯影檢測(cè)

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