siRNA、shRNA 都是啥?【科研小白】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
今天普拉特澤生物帶大家學習的是siRNA、shRNA兩種技術。siRNA(小干擾RNA)和shRNA(短發(fā)夾RNA)是兩種在基因表達調控中起重要作用的非編碼RNA分子,它們在生物醫(yī)學研究和治療應用中具有廣泛的應用。普拉特澤生物——工具平臺操作實驗服務上百例,專業(yè)代做shRNA載體構建和各種實驗,希望能對迷茫的你起到一些幫助~
我們分別開始從不同的類別介紹
siRNA
siRNA是一種雙鏈RNA分子,通常由20-25個核苷酸組成。其主要功能是在RNA干擾(RNAi)過程中通過與目標mRNA互補結合并引導其降解,從而實現(xiàn)特定基因的沉默。siRNA可以來源于內源性或外源性的長雙鏈RNA(dsRNA),經過Dicer酶切割后形成成熟的siRNA,并被加載到RNA誘導沉默復合體(RISC)中,進而識別并降解目標mRNA。
shRNA
shRNA是一種人工設計的含有發(fā)卡結構的單鏈RNA,通常由19-29個核苷酸組成,通過病毒載體或其他方式引入細胞內。在細胞內,shRNA會被Dicer酶加工成siRNA,然后參與RNAi過程,發(fā)揮與siRNA相同的作用。shRNA的設計需要考慮其環(huán)序列的長度和組成,以確保其不會與靶基因內的其他序列產生同源性。此外,shRNA可以通過穩(wěn)定整合到宿主基因組中來實現(xiàn)長期的基因沉默效果
區(qū)別與聯(lián)系
來源:siRNA可以直接合成或從長雙鏈RNA中切割得到;而shRNA則是通過設計特定的發(fā)卡結構并在細胞內加工成siRNA。
㈠穩(wěn)定性:siRNA在體內遞送時容易受到核酸酶的降解,因此需要化學修飾或載體保護;shRNA由于是單鏈形式,在體內遞送時相對更穩(wěn)定。
應用:兩者都可以用于基因功能研究、疾病模型構建以及藥物開發(fā)等領域。shRNA由于其穩(wěn)定性較高且可以在細胞內持續(xù)表達,因此在某些情況下比siRNA更具優(yōu)勢。
總結來說,siRNA和shRNA都是重要的基因調控工具,盡管它們在結構和來源上有所不同,但都通過類似機制參與基因沉默過程,為科學研究和臨床治療提供了強大的手段。
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