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細胞遷移 (cell migration) 也稱為細胞爬行、細胞移動或細胞運動，是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質的梯度后而產生的移動。細胞遷移為細胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細胞體尾部收縮在時空上的交替過程。細胞遷移是正常細胞的基本功能之一，是機體正常生長發(fā)育的生理過程，也是活細胞普遍存在的一種運動形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口愈合、免疫反應、炎癥反應、動脈粥樣硬化、癌癥轉移等過程中都涉及細胞遷移。

目前人們對惡性腫瘤的研究是多方面的，從癌癥的產生到轉移，血管供給以及分裂增殖都一直是醫(yī)學和生物學研究的熱點。對于腫瘤細胞而言，其遷移特性已經成為評價抗腫瘤藥物的重要特征；研究細胞遷移的方法較多，如劃痕法、Transwell、實時細胞追蹤和細胞芯片法等。

   今天主要給大家介紹一種應用最廣泛的檢測方法：細胞劃痕實驗

一、細胞劃痕的實驗原理

   細胞劃痕實驗(Wound Healing) 是一種研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外實驗方法。這種方法的原理為當細胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”，劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕”愈合，于細胞遷移過程中在開始和定期捕獲圖像，通過測量不同時間點的劃痕間距并計算差值，可對細胞的遷移能力做出判斷。
   傳統(tǒng)實驗方法：在融合的單層細胞上用槍頭比著直尺盡量垂直于背后的橫線劃痕；

二、細胞劃痕實驗步驟

   ①劃線，首先用馬克筆在六孔板的背部進行劃線，每孔劃3-5條線

   ②鋪板，調整好細胞狀態(tài)后，每孔鋪6×10⁵個細胞，鋪板的密度需要根據細胞本身的生長特性適當調整

   ③劃痕，當細胞鋪滿單層之后，用10μL的槍頭緊貼直尺，垂直于馬克筆標記的橫線在孔中劃線

   ④圖像采集，在100倍顯微鏡下拍照，保證劃痕居中，同時注意背景一致。

三、細胞劃痕實驗結果分析

   1、圖片處理及劃痕寬度測量

   方法一：PS軟件劃線測劃痕寬度

   方法二：ImageJ軟件測劃痕面積

   2、愈合率計算及柱狀圖展示

   以時間為橫坐標，愈合度為縱坐標進行結果的呈現(xiàn)

四、細胞劃痕實驗適用范圍

   研究細胞基質和細胞間相互作用對細胞遷移的影響

   1.可用于探究藥物、基因等外源因素對細胞遷移的影響

   2.一般適用于檢測貼壁生長腫瘤細胞的遷移轉移能力(上皮細胞、纖維樣細胞等)

       ①這些細胞本身具較強遷移能力
       ②細胞對無血清或低血清的有較強的耐受力(至少24小時)

五、細胞劃痕實驗注意事項

   1、細胞劃痕時細胞沒有長滿，或是長的太滿

   鋪板時的數量需根據細胞的形態(tài)、增殖速度、大小進行調節(jié)，細胞較小或增殖速度慢，鋪板數量需多于6×10⁵個細胞/孔；細胞較大或增殖速度較快則需少于6×10⁵個細胞/孔。
   2、怎么樣減少劃痕距離的誤差
   不同孔之間劃痕最好使用同一只槍頭，劃痕時槍頭垂直，不能傾斜，可比著直尺，保持力度一致，一次性劃完。
   3、劃痕實驗過程中培養(yǎng)條件為什么是無血清或是低血清

   可以減少單純的細胞增殖對遷移的影響。

細胞劃痕實驗具體操作視頻教程地址（建議微信打開）：http://weike.fm/R403947292

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