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    大家好，今天普拉特澤生物帶大家學(xué)習(xí)一個新的概念——細(xì)胞增殖檢測。細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞活性、藥物篩選及疾病機(jī)制研究的關(guān)鍵技術(shù)。，面對CCK-8、MTT、EdU等主流方法，如何選擇最適配的實(shí)驗(yàn)方案？普拉特澤生物細(xì)胞平臺為廣大科研工作者提供細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，本文結(jié)合最新研究數(shù)據(jù)與實(shí)驗(yàn)室實(shí)操經(jīng)驗(yàn)，系統(tǒng)解析5大方法的原理、優(yōu)缺點(diǎn)及適用場景，助您高效決策！

一、三大核心方法對比

1. MTT法：經(jīng)典但漸被替代

▲原理：活細(xì)胞線粒體酶將MTT還原為藍(lán)紫色甲臜晶體，溶解后測吸光度（570nm）13。

優(yōu)點(diǎn)：

 成本低廉（單次成本約0.5元）

 靈敏度較高（檢測限約1000個細(xì)胞）

▲缺點(diǎn)：

 需溶解步驟（DMSO或異丙醇），操作繁瑣

 細(xì)胞毒性強(qiáng)，終止實(shí)驗(yàn)后無法繼續(xù)培養(yǎng)

 背景干擾大（血清、沉淀物影響吸光度）

2. CCK-8法：高效升級版

原理：水溶性WST-8被還原為橙黃色甲臜，直接測450nm吸光度，無需溶解29。

優(yōu)點(diǎn)：

 操作簡便，適合高通量篩選（96/384孔板）

 無細(xì)胞毒性，檢測后細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)

 靈敏度提升30%（檢測限約500個細(xì)胞）

缺點(diǎn)：

 成本較MTT高（試劑價格約2倍）

 高濃度血清可能干擾結(jié)果

3. EdU法：DNA合成的金標(biāo)準(zhǔn)

原理：EdU摻入新合成DNA，通過“點(diǎn)擊化學(xué)”與熒光探針結(jié)合，直接標(biāo)記增殖細(xì)胞67。

優(yōu)點(diǎn)：

 無需抗體或DNA變性，操作時間縮短50%

 單細(xì)胞分辨率（流式/熒光顯微鏡）

 兼容組織切片與活體檢測

缺點(diǎn)：

 需熒光設(shè)備支持，成本較高

 對DNA損傷敏感，可能漏檢低增殖活性細(xì)胞

二、擴(kuò)展方法：ATP檢測與CFSE標(biāo)記

4. ATP檢測法（化學(xué)發(fā)光）

原理：ATP含量與活細(xì)胞數(shù)正相關(guān)，利用熒光素酶發(fā)光定量810。

適用場景：超高通量篩選（10分鐘出結(jié)果）

局限：無法區(qū)分增殖與非代謝活躍細(xì)胞

5. CFSE熒光標(biāo)記法

原理：熒光染料隨細(xì)胞分裂稀釋，通過流式檢測增殖代數(shù)45。

優(yōu)勢：動態(tài)追蹤細(xì)胞分裂史（適合免疫細(xì)胞研究）

局限：僅適用于懸浮細(xì)胞，操作復(fù)雜

三、選擇決策樹：5大場景推薦

四、2025技術(shù)趨勢展望

〖1〗3D培養(yǎng)專用試劑：如CCK-3D試劑盒，適配類器官與微球體檢測6。

〖2〗活體動態(tài)追蹤：新型遺傳技術(shù)ProTracer實(shí)現(xiàn)長時間、組織特異性增殖記錄（如肝臟再生研究）。

〖3〗AI圖像分析：結(jié)合深度學(xué)習(xí)自動識別EdU標(biāo)記細(xì)胞，減少人工誤差

 還有更多疑問建議或需要細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)外包的同學(xué)可點(diǎn)擊“普拉特澤”了解咨詢哦，提供原始數(shù)據(jù)，死磕真實(shí)實(shí)驗(yàn)！