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血管生長是腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵步驟。無論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長直徑超過1~2 mm，都會有血管生成，這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長因子，誘導(dǎo)血管生成。由于腫瘤組織這種新生血管結(jié)構(gòu)及功能異常，且血管基質(zhì)不完善，這種微血管容易發(fā)生滲漏，因此腫瘤細(xì)胞不需經(jīng)過復(fù)雜的侵襲過程而直接穿透到血管內(nèi)進(jìn)入血流并在遠(yuǎn)隔部位形成轉(zhuǎn)移。越來越多的研究表明，良性腫瘤血管生成稀少，血管生長緩慢；而大多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速，因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用，抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。

血管生成實驗的技術(shù)原理主要是應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境，上面接種腫瘤細(xì)胞，觀察血管生成情況。

主要步驟

Step1：細(xì)胞培養(yǎng)

Step2：細(xì)胞轉(zhuǎn)染或藥物處理

Step3：鋪Matrigel膠

Step4：接種細(xì)胞

Step5：觀察血管生成情況

實驗過程中需要注意：

1、實驗前一天需要將Matrigel置于冰盒，放入冰箱中，同時需要準(zhǔn)備一些預(yù)冷的槍頭用于吸取Matrigel膠；

2、將Matrigel膠加到血管生成載玻片時注意槍頭要垂直于內(nèi)孔的正上方加入Matrigel，防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠；

3、需要按照細(xì)胞的生長速度定時采集圖像，并且對其成管長度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點進(jìn)行測量和記錄，并且對其進(jìn)行統(tǒng)計分析；

4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面，使成像效果更好。

通過案例圖可看到，與對照組相比，處理因素能夠明顯抑制血管生成。

血管生成機(jī)制復(fù)雜，參與并促進(jìn)血管生成的因子也眾多，通過體外的血管生成實驗?zāi)芎芎玫哪M腫瘤的血管發(fā)生過程，并且研究藥物對這一過程的影響。你了解過哪些主要利用了血管生成實驗的研究呢？歡迎轉(zhuǎn)發(fā)分享哦~