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        大家好，今天普拉特澤生物開始介紹所有細胞相關實驗都要學習的最基礎的一個東西——細胞培養(yǎng)，本單元由普拉特澤生物細胞實驗平臺技術據(jù)多年實驗經(jīng)驗總結(jié)而來，如果您也養(yǎng)不活細胞或有細胞實驗代做的需求，歡迎各位來學習交流！無論是什么細胞實驗，如果連細胞都養(yǎng)不活、養(yǎng)不好傳不了，那后期再好的理論、技術、經(jīng)驗都百搭，那老規(guī)矩首先我們先來看看什么是細胞培養(yǎng)，它有哪些分類、方法、與要求呢？

        什么是細胞培養(yǎng)？

        細胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。

        我們主要培養(yǎng)哪些細胞？各自有什么培養(yǎng)的要點嗎？

        細胞培養(yǎng)的類別主要有動物細胞培養(yǎng)、植物細胞培養(yǎng)、微生物細胞培養(yǎng)三類。

        動物細胞培養(yǎng)：所有的細胞離體培養(yǎng)中，最困難的是動物細胞培養(yǎng)。動物細胞培養(yǎng)通常需要血清、支持物、氣體交換這三個條件。

        植物細胞培養(yǎng)：離體培養(yǎng)的植物細胞對光照條件相對動物細胞簡單，不甚嚴格。主要是光照與植物激素這兩個條件需要滿足。

        微生物細胞培養(yǎng)：微生物多為單細胞生物，野生生存條件比較簡單。厭氧微生物培養(yǎng)嚴格控制好二氧化碳等非惰性氣體的濃度，好氧微生物只需要用普通的玉米漿、麥芽汁等培養(yǎng)就行，對于一些需要特殊營養(yǎng)的微生物可以單獨添加。

        細胞培養(yǎng)要注意哪些環(huán)境條件？

        1、無菌環(huán)境：無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖，必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。

        2、合適的溫度：不適宜的環(huán)境溫度會影響細胞的生長。細胞對低溫的耐受能力要強于對高溫的耐受能力，在低溫下，細胞的代謝活力及核分裂能力降低。若溫度不低于0℃，雖然細胞代謝受到影響，但無損傷作用；25～35℃時，細胞以緩慢的速度生長；但若被置于40℃數(shù)小時，則不僅不利于細胞生存、生長，甚至可導致其死亡。

        3、適宜的滲透壓：高滲溶液或低滲溶液會引起細胞發(fā)生褶皺、腫脹、破裂。因此，滲透壓是體外培養(yǎng)細胞的重要條件之一。多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞對滲透壓都有一定的耐受能力，實際應用中，260～320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細胞。

        4、氣體環(huán)境與pH：大多數(shù)細胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳氣體比例為宜。

       細胞培養(yǎng)主要分為哪些操作步驟呢？

        1、器材準備工作

        準備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試，具體內(nèi)容可參閱有關文獻。

        2、細胞取材

        在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經(jīng)過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養(yǎng)器皿中，這一過程稱為取材。取材后應立即處理，盡快培養(yǎng)，因故不能馬上培養(yǎng)時，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養(yǎng)液中保存。

        3、細胞培養(yǎng)：將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。（后期專門講各種細胞的培養(yǎng)步驟）

        4、細胞凍存與復蘇：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。（后期專門講細胞凍存與復蘇的步驟）

        好啦，那細胞培養(yǎng)的簡單介紹我們就介紹到這里啦！后期我們一個個給大家介紹各種細胞的培養(yǎng)步驟、細胞的凍存、復蘇、傳代等各種操作的步驟與方法！敬請期待~我們下期見！