什么是免疫熒光技術(shù)?【附視頻教程】
來(lái)源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺(tái)
普拉特澤生物今天帶大家來(lái)學(xué)習(xí)一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)——免疫熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù),也就是我們常說(shuō)的IF實(shí)驗(yàn)。免疫熒光又稱(chēng)熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種,是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù),更是普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)分析檢測(cè)中的常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段,承接的多例免疫熒光實(shí)驗(yàn)外包也給我們積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)與多種組織樣本案例,歡迎咨詢(xún)哦~
話(huà)不多說(shuō),來(lái)看看什么是免疫熒光技術(shù)吧!
免疫熒光技術(shù)是以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)。用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱(chēng)熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱(chēng)熒光抗原法。這兩種方法總稱(chēng)免疫熒光技術(shù),因?yàn)闊晒馍夭坏芘c抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測(cè)或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測(cè)或定位抗體,但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣稱(chēng)為熒光抗體技術(shù),或稱(chēng)為免疫熒光技術(shù)。用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱(chēng)為免疫熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)技術(shù)。
免疫熒光技術(shù)的原理是:免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
那這么常用的免疫熒光有什么優(yōu)缺點(diǎn)呢?
免疫熒光的主要優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快;缺點(diǎn)是:非特異性染色問(wèn)題尚未完全解決,結(jié)果判定的客觀(guān)性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。
免疫熒光的分類(lèi)主要有:
⑴ 熒光抗體技術(shù)
抗原抗體反應(yīng)后,利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測(cè)方法。
⑵ 免疫熒光測(cè)定
抗原抗體反應(yīng)后,利用特殊儀器測(cè)定熒光強(qiáng)度而推算被測(cè)物濃度的檢測(cè)方法。
那么免疫熒光技術(shù)有哪些臨床診斷上的意義呢?
1、直接免疫熒光技術(shù)臨床意義
(1)細(xì)胞間熒光提示天皰瘡。
(2)基底膜熒光帶:在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、盤(pán)狀紅斑狼瘡的皮損,均可見(jiàn)顆粒狀的以IgG為主的帶狀分布。在類(lèi)天皰瘡為線(xiàn)狀的以IgG為主的帶狀分布。
(3)在真皮內(nèi)血管壁見(jiàn)到圈狀熒光提示血管炎。
2、間接免疫熒光技術(shù)臨床意義
(1)風(fēng)濕性結(jié)締組織?。杭t斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合征、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
(2)增生性疾?。焊咔虻鞍籽Y性紫癜、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、慢性白血病、癌腫等。
(3)感染性疾病:結(jié)核病、瘤型麻風(fēng)、組織胞漿菌病。
抗核抗體本身并非特異,滴度和核型對(duì)診斷也有重要參考價(jià)值。因此除定性外,還應(yīng)結(jié)合滴度、核型及臨床體征才具有較大價(jià)值。
3、補(bǔ)體結(jié)合法
常用來(lái)檢測(cè)患者的自身抗體,如妊娠皰疹患者。
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