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Question：如何高效構建小鼠腸炎疾病模型？（普拉特澤生物提供長期穩(wěn)定動物實驗外包服務）

在通過之前學習之后，我們來總結歸納一下構建小鼠腸炎疾病模型

根據(jù)研究目的選擇最適模型，常見方法包括：

一、 化學誘導模型（快速高效）

DSS（葡聚糖硫酸鈉）模型

方案：3-5% DSS溶于飲用水，連續(xù)給藥5-7天（急性）或周期性給藥（慢性）。

優(yōu)化點：

小鼠品系影響敏感性（C57BL/6較敏感，BALB/c需更高濃度）。

監(jiān)測體重下降（>10%）、便血（DAI評分）及結腸縮短。

優(yōu)勢：操作簡單、成本低，模擬潰瘍性結腸炎（UC）病理特征。

2.TNBS（三硝基苯磺酸）模型

⑴方案：TNBS（1.5-3 mg/只）溶于50%乙醇，經(jīng)肛門灌注（需麻醉）。

⑵適用：Th1/Th17免疫反應研究，類似克羅恩?。–D）。

Ⅰ注意：乙醇濃度過高易導致腸穿孔，需預實驗確定劑量。

3. 基因工程模型（機制研究首選）

⑴IL-10敲除（IL-10?/?）：自發(fā)慢性腸炎，需SPF環(huán)境防止感染干擾。

⑵SAMP1/YitFc：自發(fā)回腸炎，模擬CD表型。

適用場景：長期病理機制或遺傳因素研究。

4. 感染模型（微生物-免疫互作）

⑴Citrobacter rodentium：誘導Th17應答，模擬細菌性結腸炎。

⑵Helicobacter hepaticus：聯(lián)合免疫缺陷鼠（如Rag?/?）誘發(fā)慢性炎癥。

5. 過繼轉移模型（免疫細胞驅動）

CD4?CD45RB^hi T細胞轉移：將效應T細胞注入免疫缺陷鼠（如SCID），引發(fā)結腸炎。

優(yōu)勢：明確T細胞在IBD中的作用。

二、關鍵優(yōu)化策略

╚預實驗校準劑量╗

根據(jù)小鼠品系、年齡（推薦6-8周齡）、性別（雌性更耐受）調整誘導劑濃度。

例如：C57BL/6小鼠DSS濃度常為2-3%，而BALB/c需4-5%。

╚標準化環(huán)境控制╗

維持恒定溫濕度，避免應激（噪音、頻繁抓取）。

使用無特定病原體（SPF）動物房，防止腸道菌群干擾。

╚動態(tài)監(jiān)測與終止點╗

每日記錄：體重、糞便性狀（Bristol評分）、便血（Hemoccult試紙）。

終止標準：體重下降>20%或嚴重血便需人道處死。

╚菌群調控（增強模型一致性）╗

抗生素預處理（如廣譜抗生素2周）可減少個體菌群差異。

定植人源菌群小鼠（如hGBM）提升臨床相關性。

三、模型評估與驗證

表型指標

●疾病活動指數(shù)（DAI）：綜合體重、便血、腹瀉評分（0-4分）。

●結腸長度：炎癥導致結腸縮短（急性模型縮短>15%）。

●脾臟重量：免疫激活時脾臟增大。

四、組織病理學

●H&E染色評估：隱窩結構破壞、炎性細胞浸潤、潰瘍深度。

●評分標準（如Dieleman評分）：0-4分量化損傷程度。

五、分子標志物

●ELISA檢測：IL-6、TNF-α、IFN-γ等血清或結腸組織勻漿液炎癥因子。

●流式細胞術：Th1/Th17細胞比例變化。

六、常見問題與解決

▲模型變異大：統(tǒng)一供應商來源小鼠，控制飲食（避免高纖維影響DSS效果）。

▲死亡率過高：降低DSS濃度或改用TNBS模型。

▲炎癥不顯著：延長誘導時間或聯(lián)合使用DSS+TNBS。

五、倫理與實驗設計

●遵循動物福利3R原則（減少、替代、優(yōu)化），確保實驗方案通過倫理審查。

●設置對照組（正常飲水/溶劑灌腸），每組至少6-8只小鼠以減少個體差異。

通過上述方法，可在2-4周內高效建立穩(wěn)定的小鼠腸炎模型，適用于機制研究或藥物篩選。建議根據(jù)具體研究目標選擇模型，并通過預實驗優(yōu)化參數(shù)。

通過選擇合適的實驗動物、造模方法、優(yōu)化造模參數(shù)、保持飼養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定、無菌飼養(yǎng)管理操作與、定期觀察與評估以及遵循倫理原則等措施可以高效構建小鼠腸炎疾病模型。這些模型為深入研究腸炎的發(fā)病機制、評估新藥療效和探索新的治療方法提供了有力的工具。

好，今天關于如何高效構建

小鼠腸炎疾病模型

就說到這里

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