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        粒細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物技術(shù)為大家總結(jié)分享，粒細(xì)胞可由其在瑞氏染色下的表現(xiàn)分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞三種組成。普拉特澤生物流式檢測平臺(tái)為廣大科研人員提供粒細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，一起來學(xué)習(xí)吧！

        粒細(xì)胞檢測最常用的方法是流式檢測，其實(shí)驗(yàn)原理是流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測待測細(xì)胞。待測細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過激光聚焦區(qū)，激光在對每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對含量，從而得到細(xì)胞群的相對比值。

        一、常用的檢測指標(biāo)中性粒細(xì)胞（人）：CD15、CD16、CD49d（-）

        噬堿性粒細(xì)胞（人）：CD123、CD203c、CD117(-)

        噬酸性粒細(xì)胞（人）：CD11b、CD193、EMR1

        中性粒細(xì)胞（鼠）：CD11b、 Ly6G、CD115（-）

        噬堿性粒細(xì)胞（鼠）：CD200R3、 FcεRIα

        噬酸性粒細(xì)胞（鼠）：CD11b、CD193、F4 / 80

        二、粒細(xì)胞檢測的實(shí)驗(yàn)流程如下

        1、制成單細(xì)胞懸液（組織樣本）

        2、溶血（細(xì)胞樣本無需進(jìn)行此步驟）

        3、離心去上清

        4、調(diào)整細(xì)胞密度

        5、加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體

        6、孵育

        7、洗滌后離心去上清

        8、上機(jī)檢測

        三、粒細(xì)胞檢測注意事項(xiàng)

        1、為保證所得結(jié)果的可靠性，每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球檢測儀器的變異系數(shù)；

        2、每次應(yīng)做陰性對照、陽性對照、質(zhì)控對照、以確保將各種試劑及操作過程對結(jié)果的影響降至最低；

        3、外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）是一些科研實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用的材料，是利用Ficoll從全血中提取得到，主要為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞；需要檢測粒細(xì)胞等多形核細(xì)胞，就需要避免用PBMC需提供全血。

        好啦，那關(guān)于粒細(xì)胞檢測的實(shí)驗(yàn)方法就講完啦，如果您還還有什么其他的問題的話歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們~