非酒精性脂肪肝造模詳細步驟【非酒精性脂肪肝造模外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
非酒精性脂肪肝造模實驗步驟由普拉特澤生物為大家總結分享,非酒精性脂肪肝在現(xiàn)在人群中發(fā)病年率越來越高,動物模型研究非酒精性脂肪肝的發(fā)病原理與機制是藥物研究的重要手段。普拉特澤生物動物實驗平臺專業(yè)提供各類脂肪肝造模外包服務,本文就來跟大家一起學習,非酒精性脂肪肝造模的詳細操作步驟~
根據(jù)脂肪肝的不同病因,有多重造模方式,如高脂飼料喂養(yǎng)、酒精損害、毒物損傷、復合因素等方法,本文分享的是高脂飼料喂養(yǎng)進行非酒精性脂肪肝造模的方法。
1、實驗準備
實驗材料準備: SD 大鼠40只,體重200~~220g,清潔級;豬油、雞蛋黃自備;高脂造模飼料;普通飼料
2、實驗方法
(1)動物分組及處理 SD 大鼠40只,隨機分為兩組各20只。除正常對照組外,全部給予高脂飲食復制非酒精性脂肪性肝炎模型。
(2)高脂飲食由普通飼料加15%豬汕,8%蛋黃粉,2%膽固醇組成,觀察動物的體重、飲食、毛發(fā)、活動情況、肝/體重比等。。
(3)在造模第4周、8周、18 周分別處死模型組動物各2只,觀察其病理模型形成情況。
(4)第18周末將大鼠用2%戊巴比妥鈉(45mg/kg)腹腔注射,麻醉后下腔靜脈取血,將血標本離心后用于血脂檢測;取肝左葉,用10%中性福爾馬林溶液固定。
(5)石惜包埋切片,作肝細織病理學觀察。
3、實驗結果
(1)動物的一般情況
實驗期間正常組動物精力充沛,靈活好動,飲食正常,皮毛整潔,體重緩慢增加;
模型組飲食量大,嗜睡,毛色偏黃,個體較大,體重增長較正常組較快,至8周時,模型組各動物體重較正常組平均重21%,有不同程度的精神萎靡,活動減少,皮毛凌亂。
(2)體重和肝指數(shù)
兩組大鼠體重和肝指數(shù),模型組較正常組體重及肝指數(shù)均顯著增加
(3)血脂
檢測兩組大鼠的血脂,模型組與正常組相比,有顯著的差異性。
(4)肝臟病理學變化
肉眼觀察:肉眼觀察 正常組大鼠肝臟形態(tài)正常,18周時無一例出現(xiàn)異常。模型組大鼠造模4周起肝臟外形稍飽滿圓鐘,質地較脆,色紅;8~12 周肝臟體積增大,包膜緊張,色澤灰黃,切面油膩;18 周時,模型組動物肝臟明顯增大,包膜緊張,邊緣較鈍,質地略軟,色變黃,表面呈花斑狀,觸之似泥塊并有油膩感,部分大鼠肝臟有黃白魚的局灶性脂肪沉積。
光鏡觀察:
正常組肝小結構正常,肝細胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列。無肝細胞腫脹及脂肪變性。模型組肝組織HE染色顯示:造模4周后大鼠肝臟即有輕微的肝細胞脂肪變性,標本還出現(xiàn)匯管區(qū)及小葉內炎癥細胞浸潤和散在的點狀壞死;造模8周大鼠多呈中度脂肪變,且炎癥活動積分明顯高于造模4~8 周大鼠,可見到小葉內炎癥,炎癥細胞主要以單核細胞為主,炎癥程度明顯加重;造模 18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪變,脂滴分布密度通大,可見大部分旺細胞漿含大脂滴,部分脂滴形成大空泡。將細胞核擠壓至一邊,目以中央靜脈周圍為其:肝小葉結構破壞,肝細胞排列不規(guī)救,并伴大量肝細胞腫脹,部分呈氣球樣變,匯管區(qū)炎癥尚輕微。
好啦,那關于非酒精性脂肪肝動物造模的注意事項咱們就講到這里啦,有不懂的操作歡迎隨時留言給我們,如果您也正在準備進行非酒精性脂肪肝動物造模實驗或有動物造模外包的需求,歡迎選擇為真實實驗而生的普拉特澤生物~
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