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    大家好！今天普拉特澤生物繼續(xù)帶大家一起學習新動物模型——膿毒癥（Sepsis）是機體對感染反應失調導致的危及生命的器官功能障礙，建立可靠的動物模型對闡明膿毒癥發(fā)病機制、開發(fā)新型治療策略至關重要。普拉特澤生物將詳細對比CLP（盲腸結扎穿孔）和LPS（脂多糖注射）兩種最常用的膿毒癥建模方法，提供標準化操作流程和實用技巧。

一、CLP模型：臨床相關性最高的金標準

1. CLP模型原理與優(yōu)勢

①CLP通過盲腸結扎+穿孔誘導多微生物腹膜炎，最接近臨床膿毒癥病理過程：

②模擬腸道菌群移位導致的全身炎癥反應

③可分級控制疾病嚴重程度（通過結扎長度和穿孔大小調節(jié)）

④適用于膿毒癥全程研究（包括高炎癥期和免疫抑制期）

2. 標準化操作流程（以C57BL/6小鼠為例）

⑴術前準備

①動物選擇：8-12周齡雄性小鼠（雌性激素影響炎癥反應）

②禁食處理：術前禁食12小時（不禁水）

③麻醉方案：異氟烷吸入麻醉（2%誘導，1.5%維持）

⑵手術步驟

腹部備皮消毒：10%聚維酮碘溶液消毒

正中切口：約1cm切口暴露盲腸

⑴盲腸處理：

結扎50%盲腸長度（4-0絲線）

21G針頭貫通穿刺2次

臟器還納：輕柔擠壓排出少量糞便

關腹縫合：6-0可吸收縫線分層縫合

⑵術后管理：

液體復蘇：預熱生理鹽水（1mL/20g）皮下注射

鎮(zhèn)痛：布托啡諾（5mg/kg）每12小時一次

⑶監(jiān)測指標：

72小時存活率（通?？刂圃?0-60%）

體溫（<34℃提示嚴重膿毒癥）

活動度評分（0-5分量表）

3. 關鍵優(yōu)化點

穿孔大小控制：21G針頭（重度）vs 25G（中度）

菌群預處理：術前3天飲用2%硫酸新霉素可提高一致性

時間窗口：6-12小時（高炎癥期）vs 24-72小時（免疫抑制期）

二、LPS模型：簡便可控的急性炎癥模型

1. LPS模型特點

操作簡便：無需手術

高度可重復：劑量依賴性反應

局限性：僅模擬內毒素血癥早期炎癥階段

2. 標準化方案

劑量選擇（腹腔注射）

嚴重程度LPS劑量（mg/kg）適用研究

時間進程

①炎癥峰值：2-6小時（TNF-α、IL-6）

②器官損傷：12-24小時（ALT/Cr升高）

③恢復期：48-72小時

3. 改良方案

復合模型：LPS+D-半乳糖胺（增強肝損傷）

滴注模型：靜脈持續(xù)輸注（模擬臨床進展）

三、CLP與LPS模型對比指南

四、模型驗證與評價體系

1. 核心檢測指標

生理參數(shù)：

體溫（紅外熱成像）

呼吸頻率（全身體積描記）

血清標志物：

炎癥因子（IL-6、TNF-α ELISA）

器官損傷（ALT、Cr、LDH）

組織病理：

肺/肝/腎HE染色

免疫組化（HMGB1、NF-κB）

2. 嚴重程度分級標準

五、常見問題解決方案

⒈CLP術后存活率過高？

增加穿孔直徑（改用19G針頭）

延長盲腸結扎長度（至75%）

取消術后抗生素

⒉LPS反應不顯著？

⑴驗證LPS活性（鱟試劑檢測）

⑵改用靜脈注射（避免腹腔代謝差異）

⑶聯(lián)合ATP注射（增強NLRP3激活）

⒊模型變異大？

⑴固定手術操作者

⑵使用同批次動物

⑶術前適應性飼養(yǎng)≥7天

六、配套產品推薦

㈠CLP手術套裝：

專用手術器械（含微創(chuàng)牽開器）

可吸收縫合線（6-0 PDSⅡ）

㈡檢測試劑盒：

膿毒癥細胞因子陣列（含IL-1β/6/10/TNF-α）

器官損傷標志物檢測（ALT/Cr/BUN聯(lián)檢）

㈢替代模型方案：

糞液注射模型（FIP）

細菌靜脈輸注系統(tǒng)

結語：模型選擇決策樹

普拉特澤，堅持提供真實、完整、唯一原始數(shù)據、原始圖片。

普拉特澤生物，自有專業(yè)動物房、造模實驗室，配套設備齊全，技術團隊成熟，熟練掌握各類動物模型構建，更有細胞、分子、病理平臺，一站式解決后續(xù)相關實驗檢測。請點擊動物實驗平臺了解詳情。