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腦缺血?jiǎng)游锬P蜆?gòu)建全攻略:從MCAO到光血栓法的選擇與應(yīng)用

2025-04-18 17:08:59

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)

    腦缺血(Cerebral Ischemia)是腦卒中的主要病理基礎(chǔ),占所有卒中病例的80%以上。研究腦缺血的發(fā)病機(jī)制、病理生理變化及潛在治療方法,離不開可靠的動(dòng)物模型。目前,常用的腦缺血?jiǎng)游锬P桶ň€栓法(MCAO)、光化學(xué)誘導(dǎo)法(光血栓法)、四血管閉塞法(4-VO)等。 腦缺血?jiǎng)游锬P蜆?gòu)建由普拉特澤生物動(dòng)物檢測(cè)平臺(tái)總結(jié)分享,動(dòng)物檢測(cè)平臺(tái)為廣大科研實(shí)驗(yàn)人員提供【腦缺血?jiǎng)游锬P屯獍鼘?shí)驗(yàn)服務(wù)
我們將解析腦缺血?jiǎng)游锬P偷臉?gòu)建方法,對(duì)比不同模型的優(yōu)缺點(diǎn),并談?wù)撈湓谏窠?jīng)科學(xué)研究、藥物篩選及臨床轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用,幫助選擇最適合的實(shí)驗(yàn)方案。


一、腦缺血?jiǎng)游锬P偷姆诸?/span>

根據(jù)缺血范圍,腦缺血模型可分為:

①局灶性腦缺血模型(如MCAO、光血栓法)——模擬動(dòng)脈阻塞性卒中

②全腦缺血模型(如4-VO、兩血管閉塞法)——模擬心臟驟停導(dǎo)致的廣泛性腦缺氧

根據(jù)缺血持續(xù)時(shí)間,可分為:

①短暫性缺血(可逆性,如MCAO線栓再灌注)

②永久性缺血(不可逆,如電凝血管)

二、主流腦缺血模型構(gòu)建方法詳解

1. 線栓法(MCAO模型)——金標(biāo)準(zhǔn)局灶性缺血模型

原理:通過頸內(nèi)動(dòng)脈插入硅膠線栓,阻塞大腦中動(dòng)脈(MCA),導(dǎo)致皮層和紋狀體缺血。

①操作步驟

動(dòng)物準(zhǔn)備:SD或Wistar大鼠(250-300g),麻醉(異氟烷/氯胺酮),維持體溫37℃。

②頸部手術(shù):

⑴頸正中切口,分離頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。

⑵結(jié)扎ECA分支,CCA近心端夾閉,ECA遠(yuǎn)端結(jié)扎。

⑶在ECA切口插入硅膠線栓(直徑0.22-0.28mm),推進(jìn)至MCA起始部(約18-22mm)。

▲缺血與再灌注:

▲短暫性MCAO:60-120分鐘后撤出線栓,恢復(fù)血流。

▲永久性MCAO:線栓保留,不進(jìn)行再灌注。

優(yōu)點(diǎn)

模擬人類缺血性卒中

可控制缺血/再灌注時(shí)間

 梗死區(qū)域穩(wěn)定(皮層+紋狀體)

缺點(diǎn)

╳手術(shù)難度高,需顯微操作技巧

╳可能出現(xiàn)蛛網(wǎng)膜下腔出血

╳個(gè)體差異較大

2. 光化學(xué)誘導(dǎo)法(光血栓模型)——精準(zhǔn)定位缺血

原理:靜脈注射光敏劑(如玫瑰紅B),特定波長(zhǎng)激光照射目標(biāo)血管,誘導(dǎo)內(nèi)皮損傷和血栓形成。

操作步驟

動(dòng)物準(zhǔn)備:小鼠/大鼠,麻醉后固定于立體定位儀。

光敏劑注射:尾靜脈注射玫瑰紅B(10-20mg/kg)。

激光照射:

剃除顱骨表面毛發(fā),暴露目標(biāo)血管(如MCA分支)。

560nm激光照射5-10分鐘,誘導(dǎo)血栓形成。

優(yōu)點(diǎn)

→精準(zhǔn)控制缺血位置(可靶向皮層、海馬等)

→無需開顱,微創(chuàng)

→適用于抗血栓藥物研究

缺點(diǎn)

╳ 血栓形成機(jī)制與臨床卒中不完全相同

╳光照參數(shù)需優(yōu)化(強(qiáng)度、時(shí)間)

3. 四血管閉塞法(4-VO)——經(jīng)典全腦缺血模型

原理:阻斷雙側(cè)椎動(dòng)脈+頸總動(dòng)脈,造成全腦缺血(模擬心臟驟停)。

操作步驟

●第一天:電凝或結(jié)扎雙側(cè)椎動(dòng)脈。

●第二天:夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈,誘導(dǎo)全腦缺血(5-15分鐘)。

優(yōu)點(diǎn)

● 模擬心臟驟停后腦損傷

● 海馬CA1區(qū)選擇性神經(jīng)元死亡(研究記憶障礙)

缺點(diǎn)

●手術(shù)復(fù)雜,死亡率較高

●缺血時(shí)間需嚴(yán)格控制

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